注意事項:
1.重復冷凍(dong)/融(rong)(rong)化(hua)循環(huan)可使抗體變性,導致其形成使抗體結合能力降低的聚(ju)集物。保存于-20℃對于大(da)多數(shu)抗體是適當的;保存于-80℃無明顯優勢。冰箱不(bu)能為(wei)無霜型。這些冷凍(dong)和融(rong)(rong)化(hua)之間(jian)的循環(huan)(以減(jian)少結霜)恰恰是應該避免的。
2.抗體(ti)試劑瓶(ping)應置于(yu)具(ju)有(you)最(zui)小(xiao)(xiao)溫(wen)度波動的(de)(de)(de)(de)(de)冰箱(xiang)區域,例如(ru)朝冰箱(xiang)后部放置而不是置于(yu)門架上。有(you)些研究人員(yuan)加入(ru)冷凍(dong)保(bao)護劑甘(gan)油(you)達到(dao)50%的(de)(de)(de)(de)(de)終濃度以防止冷凍(dong)/融化(hua)損傷(shang):甘(gan)油(you)可將凝固(gu)點(dian)降低(di)至低(di)于(yu)-20℃。雖然這對于(yu)很多抗體(ti)是可接受的(de)(de)(de)(de)(de),但是只有(you)一小(xiao)(xiao)部分我們(men)提供(gong)的(de)(de)(de)(de)(de)抗體(ti)測試了在該保(bao)存(cun)(cun)條件下的(de)(de)(de)(de)(de)穩定(ding)性,并且我們(men)的(de)(de)(de)(de)(de)保(bao)證僅使(shi)用于(yu)按(an)數據表(biao)上推薦的(de)(de)(de)(de)(de)方式保(bao)存(cun)(cun)的(de)(de)(de)(de)(de)抗體(ti)。不建議將包(bao)含甘(gan)油(you)的(de)(de)(de)(de)(de)溶液(ye)保(bao)存(cun)(cun)于(yu)-80℃,因為該溫(wen)度低(di)于(yu)甘(gan)油(you)的(de)(de)(de)(de)(de)凝固(gu)點(dian)。請注意甘(gan)油(you)可被細菌污(wu)染,如(ru)果加入(ru)甘(gan)油(you)或任何冷凍(dong)保(bao)護劑,則應當小(xiao)(xiao)心操作(zuo),以得到(dao)無菌制(zhi)備物。
發
3.應避免抗(kang)體(ti)在(zai)稀釋至工作濃度后在(zai)4℃下(xia)(xia)保(bao)存超(chao)過一天。蛋白質(zhi)在(zai)高濃度下(xia)(xia)保(bao)存時一般不易降解,理想的(de)(de)濃度為1mg/ml或更高。這是(shi)在(zai)抗(kang)體(ti)溶(rong)液中(zhong)加入蛋白質(zhi)例如BSA作為穩定劑的(de)(de)理論(lun)基礎。加入的(de)(de)蛋白質(zhi)也(ye)有(you)助于(yu)減少抗(kang)體(ti)因結合于(yu)容器壁(bi)上而造成的(de)(de)損失。對于(yu)打算進行偶聯(lian)(lian)的(de)(de)抗(kang)體(ti)而言,由于(yu)穩定蛋白質(zhi)會與抗(kang)體(ti)競爭,降低了偶聯(lian)(lian)的(de)(de)效率,所以不應加入穩定蛋白質(zhi)。
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